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단일클론항체의 원리 및 응용

항체는 일반적으로 외부 물질(antigen)을 생물체 내에 주입, 체액성 면역반응을 유도하여 항체(antigen)생성을 유도하고, 혈액을 채취하여 얻게 된다. 이러한 방법으로 얻은 항체는 대게 polyclonal antibody(다클론 항체)이다. 체액성 면역반응에서 항원은 여러 가지 epitope로 B cell에 노출되고 B cell를 활성 시켜 항체를 만들 수 있는 plasma cell로 분화시킨다. 생물체내에서는 여러 종류의 plasma cell이 각기 다른 여러 종류의 항체를 분비한다. 한 종류의 plasma cell에서 만들어짐 한 종류의 항체만을 monoclonal antibody(단일클론항체)라 한다. 다클론항체는 여러 가지 종류의 항체가 섞인 것이므로 항체를 이용한 실험을 할 때, 원하지 않는 다른 항원에도 반응을 보이는 경우(cross reactivity)가 있어 false positive data를 보이기도 한다. 그러나 항체가 한 종류로만 구성된다면 한 가지의 특이한 epitope(항원결정기)만을 인식할 것이고 따라서 매우 특이적이고 정밀한 결과를 얻을 수 있게 된다.

 

Figure 1. 단일클론항체의 생성

한 가지 항체를 만드는 한 종류의 세포클론은 한 가지의 B cell와 어떤 암세포를 융합하여 만들어 낸다. 하나의 B cell은 한 가지 항체만을 생산하므로 단일클론 항체를 생산하려면 B cell 하나를 시험관 내에서 배양하면 된다. 그러나 B cell는 정상세포이므로 암세포와는 달리 시험관 내에서 몇 번 분열한 후 스스로 사멸한다. 따라서 B cell가 시험관 내에서 영구히 분열증식을 할 수 있도록 불멸화 하는 방법을 강구하여야 한다. 그러한 방법 중의 하나가 B cell와 암세포를 융합하여 융합세포를 만드는 것이다. 이렇게 하여 만들어진 융합세포를 hybridoma라고 하는데 이것은 B cell의 항체 생산능력과 암 세포의 시험관내 불멸화 능력을 함께 가지게 된다. 이러한 원리를 이용한 단일클론항체의 생산 방법은 다음과 같다. 먼저 마우스를 항원으로 면역한 후 비장을 적출하여 비장세포(B림프구)를 분리한다. 그 다음 무한정 증식이 가능하지만 항체를 만들어내지 못하는 마우스의 골수종세포(myeloma tumor cell)를 앞에서 얻은 B cell와 융합시켜 hybridoma를 생성한다. 그후 hybridoma를 하나씩 별도로 분리하여 조직 배양하면, 하나의 세포에서 유래된 유전적으로 동일한 세포 집단, 즉 클론(clone)이 형성되고, 하나의 클론은 한 종류의 항체만을 생산하게 …(생략)

 

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