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uffer ,, RNASE를 넣어 불순물 제거해준다. .hwp 문서. 실험 원리 : 기본적인 원리는 세균의 cell wall 과 cell membrane 을 부수고 plasmid DNA 만을 분리하는 것이다. ⑤. 1분정도 spectrafuge에 넣고 돌린후 vaccum에 넣어 말린다.zip 3. Etoh을 300microℓ 넣어 불순물은 걸러준다. t. 분리된 상층액에서 550microℓ isopropyl Alchol로 Dna만 침전 시킨다. ⑦. 14000rpm으로 10분정도 spectrafuge에 돌린다. ⑥. 다른 E-tube에 상층액 분리시킨다. ⑧. 다행히 chromosomal DNA 는 분리 과정에서 linear 형태이며 크기가 비교적 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. 반면에 EDTA는 세포벽의 integrity 를 유지하는 데 필수적인 calcium ion 을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다.Mini-prep 실험 자료 Mini-prep 실험. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA 와 plasmid DNA 를 구분하여 분리하는 것이다. solution 3을 300microℓ씩 주입후 shaking 한다. 14000rpm으로 ......
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Mini-prep 실험 자료
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3. 실험 과정 :
①. E-coly균을 spectrafuge로 5분간 600rpm으로 돌린 상층액만 따낸다.
②. solution 1을 300microℓ씩 주입후 vortexing 한다.
③. solution 2를 300microℓ씩 주입후 shaking 한다.
④. solution 3을 300microℓ씩 주입후 shaking 한다.
⑤. 얼음에 넣은후 5분정도 기다린다.
⑥. 14000rpm으로 10분정도 spectrafuge에 돌린다.
⑦. 다른 E-tube에 상층액 분리시킨다.
⑧. 분리된 상층액에서 550microℓ isopropyl Alchol로 Dna만 침전
시킨다.
⑨. 14000rpm으로 5-10분정도 spectrafuge를 돌린 후 상층액을 버리고 밑에 Dna만 남겨
놓는다.
. Etoh을 300microℓ 넣어 불순물은 걸러준다.
. 1분정도 spectrafuge에 넣고 돌린후 vaccum에 넣어 말린다.
. t.e buffer , RNASE를 넣어 불순물 제거해준다.
4. 실험 원리 : 기본적인 원리는 세균의 cell wall 과 cell membrane 을 부수고 plasmid DNA 만을 분리하는 것이다. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA 와 plasmid DNA 를 구분하여 분리하는 것이다. 이 둘은 모두 DNA 이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. 다행히 chromosomal DNA 는 분리 과정에서 linear 형태이며 크기가 비교적 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있다. lysozyme은 달걀 흰자와 눈물이나 타액과 같은 분비물에 존재하는 효소로 세포벽을 단단하게 하는 고분자 화합물을 절단시킨다. 반면에 EDTA는 세포벽의 integrity 를 유지하는 데 필수적인 calcium ion 을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다. 이 때 glucose는 삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지시켜 준다. 이 과정에서 실험상 vortex 를 해야 하는데 이 때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA 가 잘게 깨지게 되어 plasmid DNA 와 구분할 수 없게 된다. 따라서 이렇게 세포를 유지시켜가면서 세포벽만 깨는 것이다. chromosomal DNA는 세포막에 결합된 상태로 남아있게 되고 원심분리로서 침전시켜 모을 수 있으며 plasmid DNA는 상층액에서 isopropanol(Hol…(생략)
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1분정도 spectrafuge에 넣고 돌린후 vaccum에 넣어 말린다.Mini-prep 실험 자료 Mini-prep 실험. ⑨. 이 때 glucose는 삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지시켜 준다. Mini-prep 실험 자료 XS . Mini-prep 실험 자료 XS . Mini-prep 실험 자료 XS . 14000rpm으로 10분정도 spectrafuge에 돌린다. 분리된 상층액에서 550microℓ isopropyl Alchol로 Dna만 침전 시킨다. 따라서 이렇게 세포를 유지시켜가면서 세포벽만 깨는 것이다. Etoh을 300microℓ 넣어 불순물은 걸러준다. 얼음에 넣은후 5분정도 기다린다. 다른 E-tube에 상층액 분리시킨다. solution 1을 300microℓ씩 주입후 vortexing 한다. 따라서 이렇게 세포를 유지시켜가면서 세포벽만 깨는 것이다. . 이 둘은 모두 DNA 이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. 실험 과정 : ①. 반면에 EDTA는 세포벽의 integrity 를 유지하는 데 필수적인 calcium ion 을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다. . Etoh을 300microℓ 넣어 불순물은 걸러준다. solution 2를 300microℓ씩 주입후 shaking 한다. solution 3을 300microℓ씩 주입후 shaking 한다. lysozyme은 달걀 흰자와 눈물이나 타액과 같은 분비물에 존재하는 효소로 세포벽을 단단하게 하는 고분자 화합물을 절단시킨다. Mini-prep 실험 자료 XS .Mini-prep 실험 자료 Mini-prep 실험. 14000rpm으로 5-10분정도 spectrafuge를 돌린 후 상층액을 버리고 밑에 Dna만 남겨 놓는다. 반면에 EDTA는 세포벽의 integrity 를 유지하는 데 필수적인 calcium ion 을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다. ⑧. solution 1을 300microℓ씩 주입후 vortexing 한다.hwp Mini-prep 실험. Mini-prep 실험 자료 XS . Mini-prep 실험 자료 XS . ②. Mini-prep 실험 자료 XS . chromosomal DNA는 세포막에 결합된 상태로 남아있게 되고 원심분리로서 침전시켜 모을 수 있으며 plasmid DNA는 상층액에서 isopropanol(Hol…(생략) Mini-prep 실험. 14000rpm으로 5-10분정도 spectrafuge를 돌린 후 상층액을 버리고 밑에 Dna만 남겨 놓는다.hwp. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA 와 plasmid DNA 를 구분하여 분리하는 것이다. 이 과정에서 실험상 vortex 를 해야 하는데 이 때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA 가 잘게 깨지게 되어 plasmid DNA 와 구분할 수 없게 된다.. t. ⑤. . ⑤. 얼음에 넣은후 5분정도 기다린다. 분리된 상층액에서 550microℓ isopropyl Alchol로 Dna만 침전 시킨다. solution 2를 300microℓ씩 주입후 shaking 한다. Mini-prep 실험 자료 XS . E-coly균을 spectrafuge로 5분간 600rpm으로 돌린 상층액만 따낸다. . ⑥. 4. Mini-prep 실험 자료 XS . . . ③. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA 와 plasmid DNA 를 구분하여 분리하는 것이다. ⑦.zip 3.e buffer , RNASE를 넣어 불순물 제거해준다.e buffer , RNASE를 넣어 불순물 제거해준다. 다른 E-tube에 상층액 분리시킨다. chromosomal DNA는 세포막에 결합된 상태로 남아있게 되고 원심분리로서 침전시켜 모을 수 있으며 plasmid DNA는 상층액에서 isopropanol(Hol…(생략) Mini-prep 실험. 이 과정에서 실험상 vortex 를 해야 하는데 이 때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA 가 잘게 깨지게 되어 plasmid DNA 와 구분할 수 없게 된다. ⑨. ④.hwp 문서. lysozyme은 달걀 흰자와 눈물이나 타액과 같은 분비물에 존재하는 효소로 세포벽을 단단하게 하는 고분자 화합물을 절단시킨다. t. 1분정도 spectrafuge에 넣고 돌린후 vaccum에 넣어 말린다. ⑥. Mini-prep 실험 자료 XS . ③.zip 3. 다행히 chromosomal DNA 는 분리 과정에서 linear 형태이며 크기가 비교적 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있. 14000rpm으로 10분정도 spectrafuge에 돌린다. Mini-prep 실험 자료 XS . 실험 원리 : 기본적인 원리는 세균의 cell wall 과 cell membrane 을 부수고 plasmid DNA 만을 분리하는 것이다.hwp 문서. 실험 원리 : 기본적인 원리는 세균의 cell wall 과 cell membrane 을 부수고 plasmid DNA 만을 분리하는 것이다.hwp. ⑦. ④.hwp Mini-prep 실험. ⑧. 4. ②. 이 둘은 모두 DNA 이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않다. 이 때 glucose는 삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지시켜 준다. solution 3을 300microℓ씩 주입후 shaking 한다. 다행히 chromosomal DNA 는 분리 과정에서 linear 형태이며 크기가 비교적 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있E-coly균을 spectrafuge로 5분간 600rpm으로 돌린 상층액만 따낸다.Mini-prep 실험 자료 XS . 실험 과정 : .